《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部中規(guī)定：常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法、過(guò)濾除菌法、汽相滅菌法、液相滅菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。嚴(yán)格的滅菌操作非常重要，會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)芊耥樌拈_(kāi)展，筆者根據(jù)日常實(shí)際操作情況選擇了相適應(yīng)的滅菌方法進(jìn)行操作，并對(duì)其方法進(jìn)行了匯總?cè)缦拢?/p>

一、濕熱滅菌

通過(guò)熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸變性而殺滅微生物的方法。

分為三種：

1、煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細(xì)菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時(shí)間達(dá)到滅菌目的。

2、流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100℃滅菌。僅可殺死細(xì)菌繁殖體，不能完全殺滅芽孢。

3、高壓蒸汽滅菌：通過(guò)加壓提高蒸汽溫度，穿透力強(qiáng)、溫度高、滅菌效果最好。是最可靠最適用最廣泛的滅菌方法，一般采用121℃高壓滅菌15～20min或者116℃高壓滅菌30min。培養(yǎng)基、膠塞、玻璃器材等凡耐高溫和潮濕的物品可應(yīng)用本法滅菌。滅菌時(shí)，容器不可密封，需與滅菌鍋內(nèi)空氣流通。完全排出高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。（冷空氣存在時(shí)，同一表壓下所達(dá)到的溫度值偏低，不符合規(guī)定的要求，滅菌就不徹底）。

二、干熱滅菌

利用熱空氣傳遞或高溫灼燒進(jìn)行的滅菌，殺死微生物和芽孢。

分為二種：

1、灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪、等在火焰上燒灼即可達(dá)到徹底滅菌。將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等在火焰旁進(jìn)行無(wú)菌操作，利用火焰對(duì)管口等進(jìn)行滅菌，防止管口污染，作為無(wú)菌操作過(guò)程中的輔助滅菌手段。

2、干熱空氣滅菌是利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌，一般使用于金屬物品、玻璃器材等不能與蒸汽接觸的物品滅菌，須在160℃～170℃左右保持恒溫2～3小時(shí)。

三、紫外線滅菌

利用紫外燈進(jìn)行輻射滅菌?？梢詫?duì)微生物蛋白質(zhì)的破壞使其滅活。

1、在實(shí)際操作中，無(wú)菌室內(nèi)的凈化工作臺(tái)、生物安全柜、傳遞窗等安裝紫外燈。一般僅起殺死空氣中、物體表面、地面等部分微生物的作用，紫外線輻射的穿透力很弱，而不能起到完全滅菌的作用。

2、紫外線消毒方法驗(yàn)證中紫外燈需確認(rèn)的參數(shù)主要有紫外線的波長(zhǎng)、紫外線強(qiáng)度、燈管的壽命。

3、紫外燈消毒的效果與紫外線強(qiáng)度、照射時(shí)間、溫度與濕度等因素有關(guān)，還需通過(guò)驗(yàn)證來(lái)確定。

4、紫外線直射對(duì)眼、皮膚有損害。紫外線照射過(guò)程中產(chǎn)生臭氧，臭氧過(guò)多對(duì)眼及鼻腔有刺激，產(chǎn)生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無(wú)菌室及凈化工作臺(tái)紫外線照射停止后，請(qǐng)稍等片刻，讓臭氧消散，方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

四、除菌過(guò)濾

以物理的方法除去介質(zhì)中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質(zhì)用不同材料制成的薄膜濾器過(guò)濾得到無(wú)菌、無(wú)雜質(zhì)的空氣或液體。

濾過(guò)細(xì)菌的濾膜孔徑為0.22μm（或更小孔徑或相同過(guò)濾效力）。

總結(jié)：在檢驗(yàn)過(guò)程中，無(wú)論采用什么方法，都應(yīng)考慮到原有成分的穩(wěn)定性和安全性，對(duì)滅菌條件除了要求經(jīng)濟(jì)性、環(huán)保性和滅菌徹底外，還要必須保證被滅菌物質(zhì)成分不被破壞。不影響物品的質(zhì)量。